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hMAM融合HSP70基因真核表达载体的构建及其免疫学

文字大小: [大] [中] [小]  发表时间:2010-03-04 13:50  作者:admin

摘要:目的构建融合人乳腺珠蛋白(hMAM)与人热休克蛋白70(HSPT0)基因的真核表达载体pcDNA3.-1hMAM-HSF70,为乳腺癌的基因治疗奠定基础。方法采用PCR法扩增hMAM基因,酶切测序分析后,与人HSPT0基因克隆人真核表达载体pcDNA3.1,构建重组载体pcDNA3.1-hMAM-HSPT0,采用电穿孔法转染入COS-7细胞,间接免疫荧光法和ELISA法检测目的基因的表达。结果成功扩增HSPT0与hMAM基因,酶切测序结果表明,重组载体含有hMAM与人HSPT0的融合基因,COS-7细胞中可检测到hMAM表达;重组质粒免疫小鼠可诱导产生抗HSP70抗体。结论hMAM与人HSP70融合基因的真核表达载体构建成功;此为进一步进行乳腺癌的基因治疗提供了实验依据。
 

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